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【动物模型】---小鼠肝脏肿瘤模型

肝脏肿瘤原位移植使肿瘤组织增殖过程能够充分获得与原肿瘤更为相近的生长环境和生物学特点,更好模拟肿瘤细胞的免疫逃逸和侵袭转移能力;与皮下移植肿瘤相比较,摆脱了皮下结缔组织的束缚,从而更易发生肿瘤的浸润生长及转移现象。
肝脏肿瘤原位移植按照接种类型分为细胞混悬液法和肿瘤组织块法。细胞混悬液接种能模拟肿瘤细胞的免疫逃逸和侵袭转移;但成瘤率较低,且形成实体瘤时间较长;细胞混悬液容易溢出,造成肿瘤腹腔内广泛种植;但基质胶混合肿瘤细胞会限制其侵袭和转移,妨碍肿瘤侵袭转移的能力。肿瘤组织块接种分为包埋法和夹心法,形成实体瘤时间较短,肿瘤生长较快,但其不能有效模拟肿瘤在肝脏中的侵袭和转移能力。

肝脏肿瘤原位移植使肿瘤组织增殖过程能够充分获得与原肿瘤更为相近的生长环境和生物学特点,更好模拟肿瘤细胞的免疫逃逸和侵袭转移能力;与皮下移植肿瘤相比较,摆脱了皮下结缔组织的束缚,从而更易发生肿瘤的浸润生长及转移现象。
肝脏肿瘤原位移植按照接种类型分为细胞混悬液法和肿瘤组织块法。细胞混悬液接种能模拟肿瘤细胞的免疫逃逸和侵袭转移;但成瘤率较低,且形成实体瘤时间较长;细胞混悬液容易溢出,造成肿瘤腹腔内广泛种植;但基质胶混合肿瘤细胞会限制其侵袭和转移,妨碍肿瘤侵袭转移的能力。肿瘤组织块接种分为包埋法和夹心法,形成实体瘤时间较短,肿瘤生长较快,但其不能有效模拟肿瘤在肝脏中的侵袭和转移能力。

1、细胞混悬液注射模型
1、轻压胸腔暴露肝左叶,30G注射器在肝左叶边缘贴肝被膜进针,与肝脏平面呈20°进针1cm(压迫进针口)并缓慢注射25ul肿瘤细胞;
2、75%酒精浸润的医用棉棒压迫注射点2min,以达到止血及杀灭漏出肿瘤细胞,电凝封闭针眼;
3组织复位,缝合并消毒手术伤口。

2肿瘤组织块移植模型包埋模型
1、轻压胸腔暴露肝左叶,25G注射器针头在肝左叶刺出盲端空洞,按压止血并清除血液残留,组织块(2*2*1mm3)用 Matrigel 包裹,放入肝脏上的盲端孔道内,并用明胶海绵压迫封止血;
2、组织复位,缝合并消毒手术伤口。03

3肿瘤组织块移植模型夹心模型
1、将肝中叶和肝左叶向隔膜方向拨动,暴露肝右叶,先用6-0丝线穿过肿瘤组织,再从肝右叶内侧穿至外侧,然后打一个手术结,轻轻拉紧(不能拉太紧,否则容易撕裂肝脏,造成肝脏大量失血),肿瘤组织刚好可以夹在肝右叶和肝左叶之间;
2、组织复位,缝合并消毒手术伤口。

肿瘤肝脏转移模型
肝脏血流丰富,接受肝动脉和肝门静脉双重血供,其中肝门静脉由肠系膜上静脉和脾静脉汇合而成。肿瘤细胞由肝门静脉进入肝脏,能够留驻在肝脏组织间隙;受到毛细血管分布、血流等因素的影响,加之小鼠肝脏较薄,肿瘤细胞主要是在小鼠肝脏的表面或浅表部位形成多发与弥散的肿瘤组织;且不易形成肝脏组织局部栓塞,因此尤其适合于肿瘤细胞的生长与形成病灶。

肿瘤肝脏转移模型从注射部位基本分为脾脏被膜下注射和肝门静脉注射。脾脏被膜下注射可以模拟肿瘤细胞侵袭入血管,持续、缓慢释放入血的过程并且还保留脾脏的免疫功能,但脾脏原位肿瘤影响小鼠生存期;待肿瘤细胞入血后切除或半切除脾脏均可延长小鼠生存期,但仅能模拟血行转移路径且影响脾脏的免疫功能。肝门静脉注射手术难度较大、死亡率较高,且不能复制完整的转移级联,但不影响脾脏的免疫功能。01

1脾脏被膜下注射保留脾脏模型
1、30G注射器从近脾下极处贴脾脏被膜下进针0.5cm并缓慢注射100μl肿瘤细胞,可见注射处脾脏颜色变浅并肿胀和血管颜色变白,待脾脏颜色恢复正常拔出注射器,75%酒精浸润的医用棉棒压迫注射点2min,以达到止血及杀灭漏出肿瘤细胞;
2、组织复位,缝合并消毒手术伤口。

2、脾脏被膜下注射保留切除模型
1、30G注射器从近脾下极处贴脾背膜下进针0.5cm并缓慢注射100μl肿瘤细胞,可见注射处脾脏颜色变浅并肿胀和血管颜色变白,待脾脏颜色恢复正常拔出注射器,75%酒精浸润的医用棉棒压迫注射点2min,以达到止血及杀灭漏出肿瘤细胞;
2、5min后从脾脏上级开始电凝切除,遇到大血管尽量连同脂肪组织切除;
3、组织复位,缝合并消毒手术伤口。

3脾脏被膜下注射脾脏半切除模型
1、脾脏中间放置两条4-0丝线并结扎,电凝切断脾脏,脾脏上级回纳腹腔;
2、30G注射器从近脾下极处贴脾背膜下进针0.5cm并缓慢注射100μl肿瘤细胞,可见注射处脾脏颜色变浅并肿胀和血管颜色变白,待脾脏颜色恢复正常拔出注射器,75%酒精浸润的医用棉棒压迫注射点2min,以达到止血及杀灭漏出肿瘤细胞;


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